微生物檢驗中常見的半定量
在臨床微生物實驗室中,經(jīng)常會用到半定量比如“+,++,+++,++++”,它既不像 “定性檢測” 只說 “有或無”,也不像 “定量檢測” 要具體精確到每毫升多少個細(xì)菌,但它也能幫助臨床醫(yī)生做出快速感染判斷、在用藥指導(dǎo)中發(fā)揮一定的作用,今天一起來了解下微生物檢驗中常見的“半定量“。
Part.1痰培養(yǎng)
痰培養(yǎng)由于標(biāo)本粘稠且易受上呼吸道菌群污染,難以進行絕對定量。因此,實驗室常根據(jù)平板上的菌落分布和數(shù)量進行半定量檢驗,輔助判斷感染的嚴(yán)重程度。
依據(jù)平板上同一種菌在
四區(qū)劃線內(nèi)的菌落數(shù)
判定如下:
+ (少見) | <10 | ||
++ (少量) | >10 | <5 | |
+++ (中等) | >10 | >5 | <5 |
++++ (多量) | >10 | >5 | >5 |
合格痰標(biāo)本中優(yōu)勢菌常呈中度以上生長(+++)
或合格痰標(biāo)本菌少量生長,
但與涂片鏡檢結(jié)果一致
(如肺炎鏈球菌,卡他莫拉菌等)。
革蘭染色(Gram stain) 是由丹麥醫(yī)生漢斯·克里斯蒂安·革蘭于1884年創(chuàng)立的一種細(xì)菌鑒別染色技術(shù),是微生物學(xué)中最基礎(chǔ)、最重要的染色方法之一,快速區(qū)分G?和G?菌,為后續(xù)鑒定提供方向。
根據(jù)觀察到的菌數(shù)量
判定如下:
1+ | 少于1個 |
2+ | 1~5個 |
3+ | 6~30個 |
4+ | >30個 |
抗酸染色是一種主要用于檢測如結(jié)核分枝桿菌等含有大量脂質(zhì)(如分枝菌酸)的抗酸菌染色方法。這類細(xì)菌因細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)致密,普通染色難以著色,而抗酸染色利用耐酸性強的染料(如石炭酸復(fù)紅),在加熱輔助下使染料滲入并牢固結(jié)合于細(xì)菌體內(nèi),使其呈現(xiàn)紅色。
根據(jù)觀察視野數(shù)量及菌條數(shù)
判定如下:
| 陰性 | 未查見抗酸桿菌/300個視野 |
| 具體條數(shù) | 1~8條/300個視野 |
| 1+ | 3~9條/100個視野 |
| 2+ | 1~9條/10個視野 |
| 3+ | 1~9條/個視野 |
| 4+ | ≥10條/個視野 |
與抗酸染色不同,抗酸熒光染色利用金胺O等熒光染料對含有脂質(zhì)細(xì)胞壁的細(xì)菌進行特異性染色,使菌體在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光。
根據(jù)觀察視野數(shù)量及菌條數(shù)
判定如下:
| 陰性 | 未查見抗酸桿菌/50個視野 |
| 具體條數(shù) | 1~9條/50個視野 |
| 1+ | 10~49條/50個視野 |
| 2+ | 1~9條/個視野 |
| 3+ | 10~99條/個視野 |
| 4+ | ≥100條/個視野 |
結(jié)核固體培養(yǎng)不僅能用于結(jié)核分枝桿菌的分離與確診,還可進一步開展菌種鑒定和藥物敏感性試驗。
判定如下:
| 陰性 | 斜面無菌落生長 |
| 具體數(shù) | 菌落生長<斜面1/4 |
| 1+ | 菌落生長占斜面1/4 |
| 2+ | 菌落生長占斜面1/2 |
| 3+ | 菌落生長占斜面3/4 |
| 4+ | 菌落生長布滿整個斜面 |
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